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使用超微量分光光度計時,那些你不知道的事

發(fā)布時間: 2021-06-25  點擊次數(shù): 1089次 更新時間: 2021-06-25
  超微量分光光度計已成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器,儀器利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。
  
  分光光度計在日常的使用中,使用者多多少少都存在一些疑惑或使用不規(guī)范的問題,下面就常見的一些問題進(jìn)行討論。
  
  日常在使用分光光度計時,是否要經(jīng)常進(jìn)行儀器波長準(zhǔn)確度的檢查?答案是否定的。當(dāng)在日常測定中發(fā)現(xiàn)儀器測定靈敏度下降,這時才應(yīng)進(jìn)行波長準(zhǔn)確度的檢查,簡單并直接的檢查方法是:儀器開機(jī)后,調(diào)節(jié)波長為580nm,在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙,若能觀察到一長方形的黃色光斑,說明波長準(zhǔn)確度屬正常范圍,否則就應(yīng)進(jìn)行波長校正。
  
  關(guān)于超微量分光光度計的預(yù)熱問題:
  
  1、在一般分光光度計的使用說明書上,要求儀器預(yù)熱時間約20分鐘;若是帶微處理器的分光光度計,開機(jī)后儀器自動進(jìn)入自檢(初始化)狀態(tài),約需1O分鐘左右。
  
  在分光光度計預(yù)熱這個環(huán)節(jié)上,很多使用者或多或少存在問題,如開機(jī)只預(yù)熱電路系統(tǒng)(不調(diào)節(jié)波長、打開吸收池暗箱蓋預(yù)熱等)或認(rèn)為初始化過程就是預(yù)熱等等。
  
  2、對帶微處理器有自檢功能的分光光度計,開機(jī)后儀器自檢(初始化)結(jié)束后,在測定窗口上,設(shè)置所需波長值,用一個吸收池裝上純凈水置于光路上,調(diào)“0000A”后,預(yù)熱儀器,當(dāng)儀器顯示讀數(shù)不再變化后即可進(jìn)行測定。
  
  3、對于超微量分光光度計,由于有雙光源(鎢燈與氘燈),為了延長燈的使用壽命,開機(jī)自檢完成后可以關(guān)掉測定時不用的光源燈。
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